Design and Validation of a Low-Cost Smartphone Based Fluorescence Detection Platform Compared with Conventional Microplate Readers

Zhendong Cao, Katrina G. Salvante, Ash Parameswaran, Pablo A. Nepomnaschy, Hongji Dai

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1支手機分析 RGB 數值,即可取代造價高昂的 96 孔微孔板螢光讀數儀。

  • 平台相容 96 孔微孔板,單靠智慧型手機鏡頭即可完成螢光檢測。
  • 捨棄濾光片與光電倍增管等高價硬體,大幅降低光學設備製造成本。
  • 分析影像 RGB 數值,即可利用數學模型推算螢光物質的莫耳濃度。

研究團隊開發出相容 96 孔微孔板的低成本檢測平台,證實單靠智慧型手機鏡頭,即可取代昂貴的傳統微孔板讀數儀。系統捨棄了光電倍增管,改為分析影像 RGB 數值,即可精準推算樣本的螢光物質濃度。

相容 96 孔微孔板的智慧型手機螢光檢測系統

在現代生物學與環境科學領域中,分析稀釋樣本內特定微生物與分子的存在與否,往往需要仰賴精密的光學儀器。過去,這類具備高靈敏度光學感測能力的設備,體積通常相當龐大且難以輕易移動。為了降低這類檢測的硬體門檻,研究團隊開發出了一套奠基於智慧型手機的低成本螢光檢測平台。設計這套光學系統時,開發人員特別選用了能夠直接相容於傳統 96 孔微孔板(實驗室最常用的標準化多孔培養皿)的硬體配置。建構出這樣一個封閉且光線穩定的理想測量環境後,一般智慧型手機的內建相機就能夠直接化身為高靈敏度的光學感測器。透過巧妙的物理機構與載具設計,這套平台成功橋接了消費級電子產品與專業實驗室耗材,為資源匱乏地區的基礎科學檢測提供了一套具備高度可行性的替代方案。

捨棄光電倍增管與濾光片的低成本硬體架構

檢視傳統的微孔板讀數儀,例如業界極為常用的 Perkin Elmer Victor Machine,其高昂的造價主要來自於設備內部極度複雜的光學與電子零組件。運作傳統光學設備時,通常需要配備專屬的激發濾光片(用以精確篩選出特定波長的光線來激發樣本)以及阻擋濾光片(用以徹底阻擋多餘背景光並僅讓標的螢光通過)。捕捉這些微弱光線的任務,更需要依賴極度昂貴的光電倍增管(能將微弱光信號成倍放大的高靈敏度真空管)。這篇由 Zhendong Cao 等人發表的論文所提出的新一代光學裝置,大膽地將這些傳統上被光學界視為不可或缺的昂貴元件全數移除。取而代之的是,系統僅依靠現代智慧型手機內部的高密度 CMOS(互補金屬氧化物半導體)感光元件與多鏡頭模組,就完成了樣本內部螢光反應的捕捉與初步紀錄。捨棄了動輒數千美元的精密光學與電子零組件,不但大幅削減了檢測儀器製造時的物料清單成本,同時也顯著降低了設備在後續長年使用中的維護與校正難度。

利用 RGB 色彩空間運算還原樣本莫耳濃度

既然移除了專用且具備極高感光放大率的硬體元件,團隊必須轉向從軟體與演算法層面尋找彌補硬體物理限制的解法。推動這項低成本檢測技術成功運作的核心策略,在於建立一套從數位影像特徵直接反推化學物質特性的數學模型。進行微量檢測時,樣本通常會經過嚴謹的序列稀釋,而研究人員專注於分析這些稀釋樣本影像在 RGB 色彩空間(紅綠藍三原色組成的數位色彩模型)中的具體像素分佈狀態。擷取出影像畫面的紅、綠、藍色階強度數據後,系統會透過機器學習或多項式演算法,計算這些數值與樣本中螢光物質莫耳濃度之間的函數關聯性。藉由機器視覺與影像處理演算法的深度介入,原本需要極端精密硬體量測絕對光子數量的物理問題,被巧妙地轉換成了當代智慧型手機處理晶片最擅長的色彩數值分析與校準迴歸問題。這種以軟體運算能力取代硬體濾波性能的策略,徹底展現了現代邊緣感測系統設計的新思維。

IEEE 期刊前瞻技術與光學設備微型化趨勢

這份目前存放於全球知名學術開放資料庫 arXiv 平台上的最新預印本論文,標誌著電腦視覺與數位訊號處理技術跨界解決硬體工程設計瓶頸的最新嘗試。根據作者群在文獻中的詳細說明,這份手稿是準備於 IEEE(國際電機電子工程師學會)相關權威期刊正式發表的前置研究版本。從論文內容被系統明確歸類於電腦視覺與圖形識別、影像與影片處理,以及系統與控制等尖端學科領域可以看出,現代光學與生物檢測設備的發展重心,已經逐漸從純粹的光學感測硬體效能升級,大幅轉移到了終端邊緣運算與數位訊號處理技術之上。隨著全球智慧型手機影像感測器性能的持續迭代與軟體運算能力的爆發性更新,這類捨棄高階硬體濾波器、高度依賴演算法進行數學模型校正的微型化檢測平台,未來將有極大機會在水質長期監測、環境大規模採樣等分散式基礎檢測場景中,發揮更為深遠的技術影響力。

智慧型手機結合影像運算,正逐步打破實驗設備的硬體壁壘,推動光學檢測邁向平民化。

Abstract

A low cost fluorescence-based optical system is developed for detecting the presence of certain microorganisms and molecules within a diluted sample. A specifically designed device setup compatible with conventional 96 well plates is chosen to create an ideal environment in which a smart phone camera can be used as the optical detector. In comparison with conventional microplate reading machines such as Perkin Elmer Victor Machine, the device presented in this paper is not equipped with expensive elements such as exciter filer, barrier filter and photomultiplier; instead, a phone camera is all needed to detect fluorescence within the sample. The strategy being involved is to determine the relationship between the image color of the sample in RGB color space and the molar concentration of the fluorescence specimen in that sample. This manuscript is a preprint version of work related to a publication in IEEE. The final version may differ from this manuscript.